Молекулярно биологическое исследование крови на гепатит с

Хронический гепатит С

Хронический гепатит С (ХГС) – инфицирование вирусом гепатита С, длящееся более 6 мес и вызывающее некровоспалительные и фибротические изменения печеночной ткани различной степени выраженности.

Естественное течение HCV-инфекции

Вирус гепатита С (ВГС, HCV) – одна из главных причин хронических заболеваний печени. Диапазон исходов HCV-инфекции широк и колеблется от минимального до тяжелого поражения печени, включая развитие цирроза и ГЦК. В настоящее время насчитывается более 180 млн хронических носителей HCV.

Выделен ряд факторов, оказывающих отрицательное влияние на естественное течение ХГС:

  • возраст более 40 лет к моменту инфицирования,
  • мужской пол,
  • раса (не европейская),
  • злоупотребление алкоголем,
  • ожирение,
  • нарушение обмена железа,
  • метаболический синдром.

Среди них несомненная связь с прогрессированием ХГС в цироз печени (ЦП) доказана в отношении злоупотребления алкоголем.

Через 20–30 лет после инфицирования вирусом гепатита С вероятность развития цирроза колеблется от 4 до 45%. Считается, что прогрессирование в ЦП может наступать быстро (менее чем за 20 лет), средними темпами (за 20–50 лет) и медленно (более чем за 50 лет). У части больных ХГС не прогрессирует.

На основании данных, полученных в ретроспективных и проспективных исследованиях в последние 5 лет, можно сформулировать следующие положения в отношении естественного течения ХГС.

  • Первые 20 лет болезнь может персистировать без выраженного прогрессирования.
  • Прогрессирование фиброза печени имеет не линейный характер и может наступить между 20–40 годами от момента инфицирования.
  • Злоупотребление алкоголем повышает риск прогрессирования ХГС в цирроз, влияние других факторов (нарушение обмена железа, стеатоз) также может способствовать этому.
  • Хроническое заболевание печени у HCV-инфицированных снижает качество жизни и является причиной смерти не более чем у 15% пациентов.

Лабораторный мониторинг больного ВГС

Настоящий протокол имеет целью обосновать рекомендации по мониторингу ведения больных острым и хроническим гепатитом С. При его создании учитывались результаты, опубликованные в виде обзоров данных мировой литературы, рекомендаций Американской ассоциации по изучению заболеваний печени, Американской ассоциации гастроэнтерологов.

Для диагностики и мониторирования инфекции, вызванной вирусом гепатита С, используются два вида исследований:

  • серологические – для определения антител к HCV (анти-HCV) и
  • молекулярно-биологические – для выявления РНК вируса (РНК HCV).

Эти исследования не имеют значения для оценки тяжести поражения печени и прогноза заболевания.

Антитела к вирусу гепатита С определяются в плазме или сыворотке крови методом иммуноферментного анализа крови (ИФА).

Специфичность современных диагностических тестов достигает 90% и выше. Подтверждающим для анти-HCV тестом является рекомбинантный иммуноблот (RIBA).

В сыворотке крови и плазме РНК HCV тестируется как качественным методом (определяется ее наличие), так и количественным (измеряется уровень виремии, вирусная нагрузка — количество копий РНК в единице объема крови). Специфичность используемых тестов достигает 98–99%. Современные диагностические тесты позволяют определять РНК HCV с порогом в 10–50 МЕ/мл (качественными тест-системами) и в диапазоне 25–7 000 000 МЕ/мл (количественными).

Широкий диапазон показателей связан с особенностями тест-систем разных производителей. При использовании высокочувствительных тестов определения РНК HCV в режиме реального времени возможно сразу определять уровень вирусной нагрузки, минуя качественный анализ.

В ходе противовирусной терапии (ПВТ) важно проводить анализы в одной и той же лаборатории.

Известно 6 генотипов вируса гепатита С. Наиболее распространенным является 1-й генотип (субтипы 1а и 1в), далее следуют 2-й и 3-й генотипы. Редко (менее 5% случаев) в исследуемом образце крови не удается определить какой-либо известный генотип.

Общепринятым является проведение генотипирования перед противовирусным лечением, так как схема терапии определяется генотипом HCV.

Серологическая и вирусологическая диагностика ОГС и ХГС и интерпретация результатов

Для диагностики острого и хронического гепатита С требуется определение в сыворотке и антител к HCV, и РНК HCV. При подозрении на острую или хроническую HCV-инфекцию необходимо исследовать анти-HCV. Тест на РНК HCV проводят следующим категориям пациентов:

  • лицам с выявленными анти-HCV.
  • пациентам с острым вирусным гепатитом, у которых не обнаружены анти-HCV, но имеются клинические и эпидемиологические данные, требующие исключения ОГС.
  • больным, у которых решается вопрос о проведении противовирусного лечения, при возможности одновременно определяется количественный уровень РНК HCV.

Дифференциальной диагностике ОГС и ХГС способствует анализ клинических, биохимических и эпидемиологических показателей, например наличие симптомов интоксикации и появление желтухи, высокий уровень цитолиза, особенно в сочетании с данными о недавнем переливании крови, инъекционном введении наркотических средств или других факторах риска инфицирования.

Обычно РНК ВГС может определяться в крови уже через 2 нед после заражения, до появления анти-НСV, которые могут не выявляться в течение первых 8–12 нед. Оба маркёра НСV-инфекции могут обнаруживаться в крови в различных сочетаниях, что требует правильной клинической интерпретации (см. табл. 3).

Для формирования окончательного диагноза целесообразно, особенно при выявлении только одного из двух маркёров ВГС, проводить повторное тестирование анти-HCV и РНК HCV.

Морфологическая диагностика ХГС

Диагностическая ценность пункционной биопсии печени и неинвазивных маркёров фиброза

Данные, полученные при пункционной биопсии печени (ПБП), позволяют охарактеризовать текущее поражение печени, в том числе установить наличие выраженного фиброза или цирроза, и принять решение о выборе терапии. Кроме того, морфологическое исследование позволяет выявить различные гистологические признаки, которые могут оказывать влияние на прогрессирование ХГС: стеатоз, избыточное накопление железа.

Выявление этих состояний не препятствует назначению противовирусной терапии и дает дополнительную информацию о прогнозе эффективности лечения. Как и всякий инвазивный метод, ПБП, являясь «золотым стандартом» диагностики хронических гепатитов, требует выполнения правил ее проведения в специализированных учреждениях и наличия квалифицированного персонала для правильной интерпретации результатов.

Для оценки результатов ПБП используются полуколичественные шкалы определения фиброза (Knodell, Ishak, METAVIR) – см. табл. 5 и табл. 6.

В последние годы в клиническую практику внедрены неинвазивные методы оценки фиброза, прежде всего эластография. Однако информативность этого метода ограничена для разделения стадий фиброза (F1–F2 и F2– F3), но он позволяет достаточно точно диагностировать отсутствие фиброза или его минимальные значения, а также конечную стадию – F4 (цирроз).

Эластография имеет высокий уровень ошибочных результатов у больных со стеатозом печени и чрезмерным развитием подкожно-жировой клетчатки, так как возможно искажение данных в сторону увеличения стадии фиброза.

  • больным в отсутствие противовирусной терапии независимо от генотипа вируса для получения информации о стадии фиброза и прогнозе заболевания.
  • пациентам с 1-м генотипом HCV для решения вопроса о проведении ПВТ. Лица с минимальным фиброзом (0–2 балла по Ishak, 0–1 балл по METAVIR) имеют низкий риск прогрессирования ХГС и смерти от осложнений его финальных форм (в течение 10–20 ближайших лет). Более выраженные стадии фиброза являются признаком прогрессирующего заболевания и показанием к назначению противовирусного лечения.
  • при согласии больного на процедуру.

ПБП не обязательна:

  • пациентам со 2-м и 3-м генотипами HCV, так как более 70–80% из них эффективно лечатся стандартными противовирусными средствами.
  • больным с 1-м генотипом при выраженной стойкой мотивации к лечению.

Если ПБП не выполнена и лечение не назначено, пациент продолжает обследоваться всеми доступными методами ежегодно и при появлении признаков прогрессирования заболевания проводится ПБП.

Существующие неинвазивные тесты определения фиброза могут быть использованы для определения его минимальной или значительной выраженности у больных ХГС, но они не могут заменить ПБП в рутинной клинической практике для диагностики стадий F2 и F3.

Рекомендуемые диагностические тесты и кратность лабораторного и инструментального обследования больных хроническим гепатитом С, не получающих противовирусное лечение, приведены в табл. 13.

Таблица 13 Тесты и кратность выполнения исследований у больных ХГС, не получающих противовирусную терапию

https://immco.ru/category/sofvel/ https://immco.ru/category/sofled/

Что значит анализ на гепатит с положительный а пцр отрицательный

Ифа положительный пцр отрицательный гепатит с

Гепатитом С именуется поражение печени инфекционного характера, которое начинается через проникновение в организм вируса HСV (вирус гепатита С). Попадание инфекции чаще всего происходит во время контактирования с зараженной кровью.

Гепатит С имеет острую и хроническую форму. Большинство пациентов, страдающие острой формой заболевания, не знают о наличии инфекции ввиду того, что отклонений в нормальном состоянии здоровья нет. Только в некоторых случаях в ближайшее после заражения время больной может наблюдать незначительные симптомы, которые легко спутать с признаками других заболеваний. Это появление тошноты, рвоты, боли в суставах, быстрая утомляемость, отсутствие аппетита, желтуха.

Для лечения и чистки ПЕЧЕНИ наши читатели успешно используют

метод Елены Малышевой

. Внимательно изучив этот метод мы решили предложить его и вашему вниманию.

Зачастую при появлении этих отклонений больной даже не задумывается о возможности заражения гепатитом С. Без принятия терапевтических мер заболевание со временем переходит из острой в хроническую форму, и отрицательный эффект для здоровья становится максимальным.

Чтобы избежать губительных последствий, нужно внимательно относиться к своему самочувствию, и при наличии даже малейших подозрений или при появлении признаков заражения обращаться за помощью к специалистам-медикам.

Одного стопроцентно точного анализа нет. Современная медицина предлагает несколько способов обнаружения этой болезни. Благодаря этим способам легко определить факт заболевания и подобрать эффективную терапию

Для диагностирования наличия вируса необходимо произвести комплекс специальных анализов крови потенциального носителя, которые выявят положительный или отрицательный результат. Первоочередная проверка, назначенная возможному больному, называется скрининг-тестом анти-HCV. Благодаря этому тесту врач проверяет наличие в крови антител к вирусу гепатита С.

Антитела представлены белками крови, вырабатываемыми в качестве ответной реакции на проникновение инфекции. Если ответ теста на наличие антител отрицательный, то заболевание отсутствует, если положительный – это говорит о взаимодействии организма с вирусом. Тогда появляется необходимость исследования крови на наличие вируса при помощи метода ПЦР.

Диагностика недуга при помощи ПЦР

Этот способ является основным в процессе установления генетического материала вируса гепатита С в составе крови и тканях организма человека. В медицине этот способ обнаружения РНК признан эталоном в процессе диагностирования заболевания под названием гепатит С.

Если ответ на качественную ПЦР положительный, это может говорить о том, что в организме происходит процесс активной репликации в гепатоцитах HСV, если отрицательный – то вирус отсутствует.

Установление наличия РНК вируса доказывает факт заражения при наличии позитивных результатов ИФА (выявления антител).

Для назначения исследования крови методом ПЦР есть ряд показаний:

скрининговые анализы с целью профилактики (метод обнаружения РНК позволяет диагностировать, есть или нет болезнь, причем на самой ранней стадии), проверка лиц, контактирующих с носителем, диагностика ведущего вируса, если есть смешанная этиология заболевания, наличие цирроза печени, гиперпигментация в зоне ладоней и стоп, ухудшение общего состояния и ощущение постоянной усталости, увеличение размеров селезенки или печени, проверка, действенен или нет выбранный способ терапии, появление характерных реакций на коже в виде желтухи, зуда, покраснений, установление процесса активного синтеза HСV при хроническом заболевании.

По завершении исследования пациент получает результаты с указанием того, обнаружена или нет РНК вируса гепатита С в исследуемом материале. Положительный результат говорит о размножении вируса и распространении его на здоровые клетки печени, отрицательный – о том, что вируса нет.

Метод качественной ПЦР считается основным способом выявления заражения на самых ранних этапах в остром проявлении, когда процесс выработки антител в крови еще не начался.

Но даже если результат исследования отрицательный, нельзя исключать наличие в крови человека вируса.

Возможно, болезнь уже перешла в хроническую форму. Также для проведения исследования методом ПЦР используются реагенты, которые обладают определенной чувствительностью, а это значит, что при малых концентрациях HСV в крови возможно отсутствие реакции, то есть отрицательный результат. Поэтому обязательно нужно обладать информацией о чувствительности системы диагностики для больных низким порогом концентрации вируса.

Метод количественного определения РНК HСV

Такой способ представляет собой тест, при помощи которого определяют число единиц РНК вируса гепатита С, присутствующих в одном сантиметре кубическом (или 1 миллилитре) крови. Это количество принято выражать посредством чисел.

Нет прямой зависимости концентрации вируса в крови и уровня тяжести болезни. Уровень насыщенности вируса отрицательно воздействует в первую очередь на такие факторы:

уровень инфекционной активности заболевания (имеется в виду способность передачи вируса при разных видах взаимодействия с носителем), действенность выбранных способов борьбы с недугом.

Для исследования способом количественной ПЦР необходимо соответствие ряду предписаний:

Многие наши читатели для лечения и чистки печени активно применяют широко известную методику на основе натуральных ингредиентов, открытую Еленой Малышевой. Советуем обязательно ознакомиться.

обозначение схемы терапии, оценивание действенности применяемых препаратов, положительный ответ на проведенное качественное определение РНК HСV в крови потенциального больного.

Восприимчивость таких тестов обычно сильнее, нежели качественных. Если вследствие теста получен отрицательный ответ, то есть вируса в крови нет, возможно, РНК есть в незначительной неопределяемой дозе.

Установление генотипа

Наукой установлено свыше десяти вариаций вируса, но в медицинской практике есть пять наиболее часто встречающихся штаммов: 1b, 1a, 2, 3a, 4. Генотипирование РНК имеет большое значение в выборе, оценке эффективности методики борьбы с заболеванием и определении периода терапии. Это обусловлено тем, что у препарата интерферона есть ряд побочных действий, он плохо переноситься пациентами.

Для назначения оптимальной схемы приема специалисту необходимо знать штамм вируса В некоторых случаях методом ПЦР диагностируется наличие в крови пациента нескольких вариаций вируса гепатита С, но одна из них всегда будет преобладающей. ПЦР-диагностика поможет определить только этот доминантный генотип.

Все вариации вируса поддаются лечению, но для каждого типа есть отдельная схема терапии, и назначаются соответствующие препараты.

Если обнаружено наличие вируса первого, наиболее распространенного генотипа, рекомендуется дополнительно пройти исследование ИЛ-28. Благодаря этому анализу можно подобрать наиболее эффективные и оптимальные способы борьбы с заболеванием.

Взаимосвязь HСV с антителами в крови человека

Итак, первичным способом выявления вируса HСV является иммуноферментное исследование крови пациента (ИФА).

Цель этого анализа – обнаружение антител, вырабатываемых организмом в ответ на попадание в кровь вируса гепатита С. Сам вирус таким способом не диагностируется.

Антителами в медицине принято называть вещества, продуцируемые кровью человека, который заражен вирусом или привит от него. Эти вещества призваны уничтожить вирус в крови. Но после того как процесс уничтожения завершен, и больной выздоровел, антитела не исчезают. Они навсегда остаются в составе крови.

Таким образом, иммунная система защищает организм от повторного заражения. Учитывая этот факт, выявление антител в крови возможно не только у инфицированных больных, но и у здоровых людей, которые перенесли заболевание и выздоровели, или у тех, кто прошел вакцинацию.

Совет от гепатологов

В 2012 году произошёл прорыв в лечении гепатита C. Были разработаны новые противовирусные препараты прямого действия, которые с вероятностью 97% полностью избавляют вас от заболевания. С этого момента гепатит С официально считается полностью излечимым заболеванием в медицинском сообществе. В Российской Федерации и странах СНГ препараты представлены марками софосбувир, даклатасвир и ледипасвир. В настоящий момент на рынке появилось очень много подделок. Лекарства надлежащего качества можно приобрести только у компаний, имеющих лицензии и соответствующую документацию.

Перейти на сайт официального поставщика >>

Результаты исследования ИФА не всегда точны, поэтому требуется дополнительный анализ ПЦР. Этот вид диагностирования необходимо проводить после того, как выявлены антитела, и использовать для этого специальные тест-системы с высокой степенью восприимчивости.

Вследствие этого есть возможность выявления РНК вируса в начале заболевания и применения оптимальных видов лечения. Своевременное медицинское вмешательство поможет не допустить перехода болезни в хроническую стадию и минимизировать риск получения повреждений печени.

Для того, чтобы поставить точный диагноз и наметить максимально эффективную схему лечения, врачу необходимо провести комплекс вышеперечисленных исследований, а также произвести общий анализ крови, выявить уровень общего билирубина и другие.

Только комплексное обследование пациента поможет назначить действенные противовирусные препараты и определить есть или нет необходимость продолжительного их приема.

Когда ответ анализа на наличие антител положительный, а ПЦР-исследования – отрицательный, возможно организм был заражен, и болезнь развивалась незаметно для носителя, и иммунная система самостоятельно справилась с заражением, оставив антитела в составе крови.

Но, к сожалению, таких случаев мало. Искажение результатов теста может наблюдаться так же у беременных. Если заражения нет, а антитела есть, получить консультацию врача-инфекциониста, который поможет определить причину таких результатов.

Если возникают подозрения или проявляются симптомы попадания в организм вируса гепатита С, прежде всего необходимо обратиться за медицинской помощью, пройти комплекс исследований и получить квалифицированный совет специалиста. От этого будет зависеть, насколько быстро и эффективно организм справится с инфекцией.

Вам все еще кажется, что победить Гепатит С невозможно?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки — победа в борьбе с Гепатитом С пока не на вашей стороне…

И вы уже принимали токсичные препараты, у которых было куча побочек? Оно и понятно, ведь игнорирования болезни, может привести к тяжелым последствиям. Усталость, потеря веса, тошнота и рвота, желтоватый или сероватый оттенок кожи, горечь во рту, ломота в теле и в суставах… Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке?

Эффективное средство от Гепатита С существует. Перейдите по ссылке и узнайте, как вылечила Гепатит С у себя Ольга Сергеева…

https://immco.ru/category/sofdac/